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总蛋白提取试剂盒(2D电泳用)

简要描述:贝博® BBproExtra® 总蛋白提取试剂盒(2D电泳用)提供全套试剂,适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织,如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中提取总蛋白。配合其他试剂时,也可以用于植物、细菌、真菌、酵母等样品的总蛋白提取。本试剂盒含有的配方能够有效溶解细胞膜组份,包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2025-01-01
  • 访  问  量:114

详细介绍

贝博® BBproExtra® 总蛋白提取试剂盒(2D电泳用)提供全套试剂,适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织,如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中提取总蛋白。配合其他试剂时,也可以用于植物、细菌、真菌、酵母等样品的总蛋白提取。本试剂盒含有的配方能够有效溶解细胞膜组份,包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。

总蛋白提取试剂盒(2D电泳用)含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。

保存温度                        

2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期                        
一年
检测方法                        
WB,IP等
适用样本                        
动物细胞/组织
产品特点                        
1.使用方便。
2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。
产品应用
WB,IP等
仪器准备                        
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备                        
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备                        
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
使用方法
细胞总蛋白提取:
1.提取液制备:
每500ul的总蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物,混匀后备用。
2.取5-10×106个细胞,在4℃,1000×g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3.用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4.每5×106个细胞中加入500ul的总蛋白提取液,混匀后,室温振荡20-30分钟。
5.在14000×g条件下离心10分钟。
6.将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白。
7.将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

组织总蛋白提取:
1.提取液准备:
每500ul冷的总蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2.取50-100mg组织样本,用PBS洗干净,然后用刀尽可能剪碎,加入500ul总蛋白提取液,用组织匀浆器/匀浆机匀浆至无明显肉眼可见固体。
3.将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中,在4℃条件下振荡10-20分钟。
4.在4℃,10000-14000×g条件下离心15分钟。
5.将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到总蛋白。
6.将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

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